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miRNA 是較小(約 22 bp)的高度保守非編碼 RNA,在每種細(xì)胞類(lèi)型中進(jìn)行內(nèi)源性表達(dá)。它通過(guò)堿基對(duì)互補(bǔ)使靶轉(zhuǎn)錄本沉默,從而起到基因表達(dá)關(guān)鍵調(diào)控因子的作用。許多研究表明miRNAs的表達(dá)譜與疾病息息相關(guān),且可穩(wěn)定的存在于多種體液(包括血液、唾液和尿液),出于這些原因,miRNA 作為非侵入性生物標(biāo)志物成為了包括癌癥在內(nèi)幾乎所有人類(lèi)疾病的理想候選生物標(biāo)志物。
乳腺癌是女性最常見(jiàn)的癌癥之一,醫(yī)學(xué)技術(shù)發(fā)展到今天,可以說(shuō)很多乳腺癌都可以被治愈,但三陰性乳腺癌患者的治療和生存不容樂(lè)觀。很難治療,因此迫切需要找到相關(guān)的生物標(biāo)志物來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)該疾病的早期檢測(cè)。研究表明5 個(gè) miRNA 的表達(dá)譜(miR-92a-3p、miR-342-3p、miR-16、miR-21 和 miR-199a-5p)可以有效區(qū)分 TNBC 和非 TNBC,有望在將來(lái)用于 TNBC 的診斷。
基于這些前期研究,海南醫(yī)學(xué)院呂卓璇研究員聯(lián)合碧芯生物共同開(kāi)發(fā)了高通量檢測(cè)三陰性乳腺癌相關(guān)miRNAs表達(dá)的方法。其原理主要是將等溫?cái)U(kuò)增中的滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)與懸浮芯片(磁性熒光編碼微球)相結(jié)合,具體研究步驟如圖1所示,首先將與TNBC相關(guān)的miRNA反轉(zhuǎn)成cDNA,然后再通過(guò)其對(duì)應(yīng)的連接引物連接成環(huán);連接再不同熒光編碼微球上的特異性的引物會(huì)與DNA環(huán)互補(bǔ)配對(duì),對(duì)成環(huán)產(chǎn)物進(jìn)行滾環(huán)擴(kuò)增;最后通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)編碼微球和擴(kuò)增產(chǎn)物(采用熒光標(biāo)記的dUTP)的熒光標(biāo)記信號(hào)確定待測(cè)RNA樣本的miRNA的類(lèi)別和表達(dá)水平。
該篇文章“High-throughput quantitative detection of triple-negative breast cancer-associated expressed miRNAs by rolling circle amplification on fluorescence-encoded microspheres" 近期發(fā)表于在Chinese Chemical Letters (CCL)(2022年中科院分區(qū)1區(qū), IF= 8.455)。
碧芯生物是一家專(zhuān)業(yè)從事低吸附磁性熒光編碼微球自主研發(fā)以及流式細(xì)胞法檢測(cè)多重蛋白試劑盒開(kāi)發(fā)的生物高科技企業(yè)。公司是由在生物、材料、醫(yī)學(xué)等多學(xué)科領(lǐng)域有著扎實(shí)研究基礎(chǔ)和豐富實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的博士團(tuán)隊(duì)組成。現(xiàn)已開(kāi)發(fā)70種低吸附磁性熒光編碼微球,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研發(fā)出可靈活組合的多細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒,包括小鼠多細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-12p70、IL-1β,MCP-1、IFN-γ、TNF-α)和人類(lèi)多細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-8、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、IFN-α2)。這些細(xì)胞因子的檢測(cè)可根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行自組合搭配,滿(mǎn)足客戶(hù)多樣化應(yīng)用場(chǎng)景的需求。
新的學(xué)期又要開(kāi)始了,碧芯生物將提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),祝愿各位老師取得更多更好的科研成果。
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